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10月15日,中國科學院分子植物科學卓越創(chuàng)新中心趙春釗研究組在《細胞報告》(Cell Reports)上,發(fā)表了題為FERONIA controls ABA-mediated seed germination via the regulation of CARK1 kinase activity的研究論文。該研究借助遺傳學、生物化學和生物信息學等研究手段,揭示了類受體激酶FERONIA通過類受體胞質(zhì)激酶CARK1調(diào)控脫落酸信號通路和種子萌發(fā)的新機制。
種子是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的“芯片”,關(guān)系到糧食安全問題。種子萌發(fā)通常受到環(huán)境因素的影響,因此研究逆境環(huán)境下種子萌發(fā)的調(diào)控機制,對于培育優(yōu)良種子具有理論意義和應用意義。
脫落酸(ABA)核心信號通路包括脫落酸受體PYR1/PYLs、磷酸酶PP2Cs和激酶SnRK2s,在調(diào)控種子萌發(fā)過程中發(fā)揮著重要作用。研究表明,脫落酸受體PYR1/PYLs受到多個激酶磷酸化修飾,而磷酸化修飾的早期調(diào)控機制有待解析。類受體激酶是細胞膜定位蛋白之一,參與植物對外界信號的感知和傳遞,在植物生長發(fā)育和環(huán)境響應中具有關(guān)鍵作用。植物細胞存在大量類受體胞質(zhì)激酶,而這類蛋白通常作用于類受體激酶的下游來傳遞外界信號。研究發(fā)現(xiàn),類受體激酶FER和類受體胞質(zhì)激酶CARK1作用于一個信號通路來調(diào)控脫落酸介導的種子萌發(fā)。
研究顯示,FER基因突變導致脫落酸條件下種子萌發(fā)加快,而脫落酸觸發(fā)的SnRK2s激活減弱,表明FER在脫落酸信號轉(zhuǎn)導中發(fā)揮正調(diào)控作用。研究通過分析FER的免疫沉淀-質(zhì)譜數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn),ER和類受體胞質(zhì)激酶VIII亞家族成員CARK1存在相互作用。CARK1是在種子中高表達的類受體胞質(zhì)激酶,而隨著種子萌發(fā)其轉(zhuǎn)錄水平逐漸降低,說明CARK1在種子萌發(fā)過程中可能發(fā)揮負調(diào)控作用。同時,CARK家族成員CARK2、CARK10和CARK11也在種子中高表達,并隨著種子萌發(fā)而表達量下降,說明CARK基因或共同參與調(diào)控種子萌發(fā)。
生化結(jié)果顯示,FER磷酸化CARK1的第233位絲氨酸和第234位蘇氨酸這兩個位點的磷酸化是CARK1激酶活性所需要的。結(jié)果表明,FER通過磷酸化來增強CARK1的激酶活性。同時,cark1單突變體表現(xiàn)出在脫落酸條件下萌發(fā)快的表型,而Ser233和Thr234位點突變成Ala的CARK1不能互補cark1的萌發(fā)表型,說明Ser233和Thr234的磷酸化對于CARK1的功能是必需的。ABI5是脫落酸信號通路下游抑制種子萌發(fā)的主要轉(zhuǎn)錄因子,而在fer-4和cark1突變體中脫落酸誘導的ABI5積累降低,表明FER和CARK1通過脫落酸信號通路正調(diào)控ABI5的蛋白穩(wěn)定性。遺傳分析顯示,過量表達脫落酸受體PYL9能夠抑制fer-4突變體在脫落酸條件下種子萌發(fā)快的表型,證明FER通過ABA信號通路調(diào)控種子萌發(fā)。因此,FER通過磷酸化修飾激活CARK1激酶,正調(diào)控脫落酸介導的種子萌發(fā)抑制。
該研究揭示了直接作用于FER下游的類受體胞質(zhì)激酶,闡明了脫落酸和脅迫條件下種子萌發(fā)調(diào)控的新機制。研究工作得到國家重點研發(fā)計劃、國家自然科學基金、中國科學院相關(guān)項目等的支持。
脫落酸核心信號通路負調(diào)控種子萌發(fā)
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