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1949年,伴隨著新中國的誕生,中國科學院成立。
作為國家在科學技術(shù)方面的最高學術(shù)機構(gòu)和全國自然科學與高新技術(shù)的綜合研究與發(fā)展中心,建院以來,中國科學院時刻牢記使命,與科學共進,與祖國同行,以國家富強、人民幸福為己任,人才輩出,碩果累累,為我國科技進步、經(jīng)濟社會發(fā)展和國家安全做出了不可替代的重要貢獻。 更多簡介 +
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酮是有機化學和生物催化的基礎化合物,也是藥物和食品等高值化學品的重要砌塊。酮相比醛具有更大的惰性,適用于醛的顯示方法,往往不能適用于酮。目前報道的酮檢測方法普遍存在靈敏度低、底物譜窄、檢測環(huán)境受限等制約因素,因此,發(fā)展更具廣譜性和通用性的酮類物質(zhì)高通量篩選方法十分重要。
中國科學院天津工業(yè)生物技術(shù)研究所研究員孫周通帶領的酶分子工程與工業(yè)生物催化研究團隊,圍繞這一技術(shù)問題,通過顯色劑篩選,建立了一種新的酮類物質(zhì)的高通量檢測方法。通過使用熒光染料對甲氧基-2-氨基芐胺肟(PMA)可以快速測定多種結(jié)構(gòu)的酮類化合物。該檢測方法具有靈敏度高(μM級別)、擬合度強(R2>0.9)、底物譜廣(可檢測四大類20余種酮類物質(zhì))、背景噪音低、顯色穩(wěn)定等優(yōu)點,且可以用于全細胞或體外酶催化體系。將該高通量顯示方法用于基于酮類還原和氧化反應的新酶挖掘與定向進化篩選,獲得新的醇脫氫酶和催化活力提升的突變體。該研究開發(fā)的基于PMA的熒光篩選方法可以適用于酮類物質(zhì)的微孔板篩選,為基于酮類物質(zhì)的新型生物催化劑的發(fā)現(xiàn)和改造提供了通用的高通量篩選手段,提高了篩選效率。
研究工作得到國家重點研發(fā)計劃等的支持,相關(guān)研究成果在線發(fā)表在ACS Omega上。天津工生所與天津科技大學聯(lián)合培養(yǎng)碩士研究生梅澤龍、天津工生所博士后張錕為論文共同第一作者,天津工生所研究員孫周通和副研究員涂然為論文共同通訊作者。
PMA-酮熒光篩選流程圖
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