——習(xí)近平總書記在致中國(guó)科學(xué)院建院70周年賀信中作出的“兩加快一努力”重要指示要求
——中國(guó)科學(xué)院辦院方針
語音播報(bào)
45億年的地球演化,產(chǎn)生了酸性土壤、海斗深淵等截然不同的極端環(huán)境和宜居生境,但微生物如何適應(yīng)環(huán)境脅迫并實(shí)現(xiàn)全球擴(kuò)散,一直是研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。最近,中國(guó)科學(xué)院南京土壤研究所賈仲君團(tuán)隊(duì)經(jīng)過8年努力,聯(lián)合國(guó)內(nèi)外同行,發(fā)現(xiàn)能量中心ATPase基因水平轉(zhuǎn)移是古菌AOA適應(yīng)酸性脅迫和深海高壓的遺傳新機(jī)制,研究成果最近在國(guó)際期刊The ISME Journal上發(fā)表。
據(jù)估算,全球30%以上的陸地表層土壤偏酸性(pH<5.5),但古菌AOA的嗜酸機(jī)制一直是研究難點(diǎn)。主要原因是:(1)土壤形成需要至少上萬年,地質(zhì)時(shí)間尺度下的嗜酸古菌AOA發(fā)育不可重復(fù)、無法模擬、很難驗(yàn)證;(2)古菌AOA生長(zhǎng)緩慢,很難用傳統(tǒng)培養(yǎng)方法研究。針對(duì)這些難點(diǎn),賈仲君研究團(tuán)隊(duì)開發(fā)了系統(tǒng)發(fā)育宏基因組技術(shù),突破了古菌AOA氨單加氧酶的傳統(tǒng)研究思維,聚焦于普適性的能量貨幣ATP合成基因;構(gòu)建了古菌的地質(zhì)歷史系統(tǒng)發(fā)育圖譜,提出了V-型ATPase基因水平轉(zhuǎn)移的古菌嗜酸耐壓新機(jī)制。首先,利用高度靈敏的13C和15N同位素示蹤技術(shù),克服了古菌難培養(yǎng)的難題,在復(fù)雜土壤中清楚表征了古菌AOA的嗜酸生長(zhǎng)特點(diǎn),獲得了高度富集的AOA古菌13C-DNA;通過整合PacBio單分子長(zhǎng)片段和illumina高通量測(cè)序優(yōu)勢(shì),重構(gòu)了三個(gè)不同生態(tài)型的酸性土壤古菌AOA基因組MAG;進(jìn)一步利用系統(tǒng)發(fā)育組學(xué)技術(shù),結(jié)合蛋白結(jié)構(gòu)的計(jì)算模擬,發(fā)現(xiàn)所有酸性土壤AOA僅含V-型ATPase基因簇,而所有中性和堿性土壤AOA僅含A-型ATPase。在此基礎(chǔ)上完成了遺傳功能的異源驗(yàn)證,發(fā)現(xiàn)導(dǎo)入V-型atp 操縱子(8623bp)后,大腸桿菌(E. coli)能夠更好適應(yīng)酸性脅迫生長(zhǎng)。這些結(jié)果清楚說明,V-型ATPase是古菌AOA適應(yīng)酸性脅迫的關(guān)鍵模塊。
同時(shí)發(fā)現(xiàn),所有淺海AOA僅含A-型ATPase,而深海AOA均含V-型ATPase,純培養(yǎng)研究則表明A-型ATPase不具有耐壓功能;進(jìn)一步分析四個(gè)超級(jí)門208個(gè)古菌物種分布的基因組規(guī)律(TACK、DPANN、Asgard和Euryarchaeota),發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)發(fā)育單支源底部的Thermoplasmatales 廣古菌ATPase基因簇兩側(cè)含有橫向基因側(cè)移的特征轉(zhuǎn)移酶和內(nèi)切酶,在大約7~11億年前,極可能將V-型ATPase基因水平轉(zhuǎn)移至古菌AOA,導(dǎo)致其獲得耐高壓的生理功能。此外,也發(fā)現(xiàn)V型ATPase可能是古菌嗜鹽厭氧的重要基礎(chǔ),為重構(gòu)古菌生理的地球演化歷史提供了新思路。
這一發(fā)現(xiàn)為地質(zhì)時(shí)間尺度下古菌AOA的全球分布及擴(kuò)散提供了遺傳代謝新機(jī)制。中性土壤中的古菌AOA,通過基因水平轉(zhuǎn)移獲得V型ATPase即可成功定居于酸性環(huán)境,而淺海AOA則獲得耐高壓能力并棲息于海斗深淵。研究工作得到編輯的好評(píng),應(yīng)邀撰寫了behind the paper亮點(diǎn)并發(fā)表在Nature research 微生物專欄。
該工作與4個(gè)國(guó)家15個(gè)科研機(jī)構(gòu)的同行合作完成,特別得到了中科院微生物研究所研究員黃力、南京農(nóng)業(yè)大學(xué)教授閆新、深圳大學(xué)高等研究院教授李猛、美國(guó)華盛頓大學(xué)教授David Stahl和維也納大學(xué)教授Michael Wagner團(tuán)隊(duì)等相關(guān)領(lǐng)域?qū)<?,以及PacBio單分子測(cè)序公司和美吉生物公司的支持。南京土壤所博士王保戰(zhàn)、華盛頓大學(xué)博士秦瑋、美吉生物博士任一為論文第一作者,賈仲君為通訊作者。研究工作得到中國(guó)國(guó)家基金委面上項(xiàng)目、水圈重點(diǎn)項(xiàng)目、中科院青促會(huì)和先導(dǎo)專項(xiàng)B以及美國(guó)國(guó)家基金委和能源部等的資助。
土壤和海洋古菌AOA及四個(gè)超級(jí)門嗜酸耐壓環(huán)境適應(yīng)機(jī)制及其地球進(jìn)化示意圖
土壤和海洋古菌AOA的物種系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系及其與ATPase基因的關(guān)聯(lián)分析
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