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　　定向進(jìn)化技術(shù)是改造酶催化特性（如立體/區(qū)域/化學(xué)選擇性、活性、熱穩(wěn)定性等）的有效手段。前期研究證明，對位于酶催化口袋的氨基酸殘基進(jìn)行飽和突變（SM）可成功控制酶的選擇性和活性。作為常用的簡并密碼子，NNK可編碼20種氨基酸，但隨著突變位點(diǎn)的增多，篩選量呈指數(shù)級(jí)增長（20m，m為位點(diǎn)數(shù)目）。如何通過精簡密碼子設(shè)計(jì)并構(gòu)建高效突變體文庫，從而克服篩選瓶頸受到越來越多的關(guān)注。
　　中國科學(xué)院天津工業(yè)生物技術(shù)研究所研究員孫周通帶領(lǐng)的酶分子工程與工業(yè)生物催化研究團(tuán)隊(duì)圍繞這一難題，以檸檬烯環(huán)氧水解酶和P450單加氧酶為研究對象，分別用NNK、NDT、理性設(shè)計(jì)的精簡密碼子等多種簡并密碼子設(shè)計(jì)方法構(gòu)建突變體文庫，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在相同篩選量下理性設(shè)計(jì)的精簡密碼子獲得有益突變體數(shù)量顯著增高，并基于統(tǒng)計(jì)學(xué)（Patrick/Firth及Nov計(jì)算）分析得到理論支持。該工作首次證明，精簡密碼子設(shè)計(jì)與高覆蓋度的篩選可快速獲得有益突變體，文章發(fā)表于期刊ACS Catalysis。
　　該研究得到中科院項(xiàng)目資助，天津工生所助理研究員曲戈為論文共同第一作者，孫周通及德國馬普煤炭所/天津工生所教授Manfred T. Reetz為共同通訊作者。
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　　突變體文庫構(gòu)建策略比較