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6月27日,國際學(xué)術(shù)期刊Plant Physiology 在線發(fā)表了中國科學(xué)院分子植物科學(xué)卓越創(chuàng)新中心/植物生理生態(tài)研究所何玉科研究組題為microRNA166 monitors SPOROCYTELESS/NOZZLE (SPL/NZZ) for building of the anther internal boundary 的研究論文。
雄蕊(stamen)是開花植物重要的生殖器官之一,由頂端的花藥(anther)和基部的花絲(filament)組成。許多基因參與對花藥發(fā)育的調(diào)控,它們之間相互協(xié)調(diào)、相互制約,形成了一個復(fù)雜而有序的基因網(wǎng)絡(luò)調(diào)控花藥形成、小孢子囊發(fā)育、花粉形成、花粉開裂等生物學(xué)過程。在諸多參與花藥發(fā)育的基因中,SPOROCYTELESS/NOZZLE(SPL/NZZ)是調(diào)控小孢子囊早期發(fā)育的中樞因子,參與孢原細胞的早期增殖和分化過程;WUSCHEL(WUS)被報道調(diào)控花藥開裂和隔膜細胞發(fā)育的基因。
何玉科研究組發(fā)現(xiàn)miR166g過量表達的半顯性突變體jabba-1D(jba-1D)花藥發(fā)育存在嚴重缺陷,小孢子在花藥中側(cè)軸的異位形成導(dǎo)致開裂區(qū)缺失以及內(nèi)外側(cè)小孢子囊的融合。在花藥發(fā)育過程中,miR165/6靶基因PHB的表達重排定義了SPL/NZZ和WUS空間排布,控制了小孢子發(fā)生、內(nèi)外側(cè)小孢子囊邊界和開裂區(qū)的形成。RNA原位雜交結(jié)果顯示與野生型相比,PHB的表達在jba-1D中減弱,SPL/NZZ在中側(cè)軸內(nèi)外小孢子囊邊界區(qū)異位表達,而本應(yīng)在中側(cè)軸表達的WUS則檢測不到任何雜交信號;相比之下,miR165/6靶基因PHB的功能獲得性突變體phb-7D中PHB表達增強,SPL/NZZ表達區(qū)域縮減;WUS表達增強,在部分花藥內(nèi)側(cè)某個角落異位表達,而該角落結(jié)構(gòu)出現(xiàn)發(fā)育受阻的現(xiàn)象。
為了進一步揭示miR165/6靶基因PHB與SPL/NZZ之間的遺傳關(guān)系,獲得了phb-7D jba-1D、phd-7D spl和 phd-7D spl-D/+雙突變體。掃描電鏡顯示phb-7D回復(fù)了jba-1D的花藥不開裂表型;半薄切片顯示phb-7D jba-1D雙突變體花藥內(nèi)外側(cè)小孢子囊之間能夠形成分隔。phd-7D spl展現(xiàn)出與spl相似的花藥缺陷,而phd-7D spl-D/+則部分回復(fù)phb-7D的表型,表明SPL/NZZ對PHB具有遺傳上位性。凝膠阻滯實驗表明PHB直接結(jié)合SPL/NZZ的啟動子。染色質(zhì)免疫共沉淀的結(jié)果證實PHB在體內(nèi)可以分別與SPL/NZZ和WUS的啟動子結(jié)合。糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)表達體系結(jié)果顯示PHB受誘導(dǎo)表達后抑制下游基因SPL/NZZ的表達,激活WUS基因的表達。因此,在花藥發(fā)育過程中miR165/6靶基因PHB分別通過調(diào)控下游基因SPL/NZZ和WUS的空間分布決定了小孢子發(fā)生、內(nèi)外側(cè)小孢子囊邊界和開裂區(qū)的形成(如圖)。
分子植物卓越中心李曉榮和練恒為該論文的共同第一作者,何玉科為通訊作者。該研究得到科技部國家重點研發(fā)計劃和國家自然科學(xué)基金的經(jīng)費資助。
miR165/6調(diào)控花藥內(nèi)外小孢子囊邊界形成的模式圖
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